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    ELISA實(shí)驗(yàn)背景過(guò)高的主要原因有哪些呢?

    點(diǎn)擊次數(shù):2687  更新時(shí)間:2019-02-15

     在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中往往會(huì)有不盡人意的地方,比如說(shuō)ELISA實(shí)驗(yàn)背景過(guò)高,那么 造成ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)背景過(guò)高的主要原因有哪些呢?
    1、不正確的洗滌

      洗滌不充分或省略洗滌步驟中的任何一步均會(huì)導(dǎo)致背景色過(guò)高。

     解決方法:檢查洗滌緩沖液的體積并確保完成所有的洗滌步驟;確保洗滌緩沖液的正確稀釋和正確使用。

     2、底物污染

      確保在使用前,底物不被金屬離子或氧化劑污染;在實(shí)驗(yàn)時(shí)留存一些額外的底物,底物本身不應(yīng)該有顏色。

    3、底物曝光

      底物曝光會(huì)使底物變成藍(lán)色,因此在加入板內(nèi)之前要保存在暗處(即試劑瓶?jī)?nèi))。

    4、HRP的錯(cuò)誤稀釋

      HRP濃度過(guò)高會(huì)造成高背景色,因此要嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)稀釋。

     5、錯(cuò)誤的孵育時(shí)間和溫度

     必須嚴(yán)格按照產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)來(lái)定孵育時(shí)間和溫度。

     6、包被板保存不當(dāng)

      如果包被板只用了一部分,一定要正確保存剩余的板條。

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